WML2小鼠肺成纖維細胞

WML2小鼠肺成纖維細胞是體外研究肺部生理功能、病理進程及藥物篩選的重要細胞模型，源自小鼠肺組織中的成纖維細胞，經標準化培養與鑒定后，保留了原代肺成纖維細胞的核心生物學特性，為肺部疾病機制解析、藥物研發等領域提供了穩定且可靠的實驗工具，在呼吸系統相關研究中具有不可替代的作用。

從細胞來源與生物學特征來看，該細胞系分離自正常小鼠的肺間質組織，肺成纖維細胞作為肺間質的主要功能細胞，在維持肺組織結構完整性、參與肺組織修復與重塑過程中發揮關鍵作用，而 WML2 細胞高度還原了這一功能屬性。在形態上，該細胞呈現典型的成纖維細胞樣形態，胞體呈梭形或長梭形，細胞核呈橢圓形，位于細胞中央，細胞質豐富且均勻，在體外貼壁培養時，細胞會有序排列生長，融合后呈現出 “漩渦狀" 或 “放射狀" 的生長特征，這一形態特征與體內肺成纖維細胞的形態高度一致，為實驗觀察與鑒定提供了直觀依據。此外，該細胞還保留了肺成纖維細胞te有的標志物表達，如波形蛋白（Vimentin）、成纖維細胞特異性蛋白 1（FSP-1）等，通過免疫熒光染色或 Western blot 檢測可明確其細胞身份，確保實驗用細胞的純度與特異性，避免因細胞污染或身份混淆影響實驗結果。

在培養條件與操作要點方面，WML2 小鼠肺成纖維細胞對培養環境的適應性較強，常規實驗室條件即可滿足其生長需求。培養基推薦使用含 10%-15% 胎牛血清（FBS）的 DMEM/F12 混合培養基，該培養基能為細胞提供充足的營養物質，如氨基酸、維生素、礦物質等，同時胎牛血清中的生長因子可促進細胞增殖與活性維持；培養環境需維持在 37℃、5% CO?的恒溫培養箱中，CO?濃度可維持培養基 pH 值穩定在 7.2-7.4 的適宜范圍，保證細胞正常代謝與生長。傳代操作時，需密切觀察細胞融合度，當細胞融合度達到 70%-80% 時進行傳代，此時細胞活性最佳，傳代后增殖能力強。傳代前需用磷酸鹽緩沖液（PBS）清洗細胞 2-3 次，去除殘留的培養基與代謝廢物，隨后加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液，37℃孵育 1-2 分鐘，待細胞形態變為圓形、間隙增大時，加入含血清的培養基終止消化，輕輕吹打細胞使其分散成單細胞懸液，按 1:3-1:5 的比例接種至新培養瓶中。培養過程中需每 2-3 天更換一次培養基，及時清除細胞代謝產生的乳酸、氨等有害物質，避免其積累影響細胞活性；同時需嚴格遵守無菌操作規范，接種、傳代、換液等操作均需在超凈工作臺內進行，培養基、PBS、消化液等試劑使用前需經高壓滅菌或過濾除菌處理，定期對培養箱、超凈工作臺進行清潔與消毒，防止細菌、真菌或支原體污染，確保細胞培養的穩定性與安全性。此外，細胞凍存時建議使用含 10% 二甲基亞砜（DMSO）、20% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養基作為凍存液，將細胞濃度調整為 1×10?-1×10?個 /mL，按照 4℃放置 30 分鐘、-20℃放置 1 小時、-80℃過夜的梯度降溫方式處理后，轉入液氮長期保存，復蘇時需將凍存管迅速放入 37℃水浴鍋中融化，離心去除凍存液后接種至新鮮培養基，可有效提高細胞復蘇率。

在功能特點與科研應用領域，WML2 小鼠肺成纖維細胞憑借其貼近體內肺成纖維細胞的功能特性，被廣泛應用于肺部疾病機制研究、藥物篩選及細胞生物學研究等方面。在肺部疾病機制研究中，該細胞是探究肺纖維化、慢性阻塞性肺疾病（COPD）、肺部感染等疾病的核心模型。例如，在肺纖維化研究中，肺成纖維細胞的異常增殖與活化是疾病發生的關鍵環節，研究人員可通過向 WML2 細胞中加入轉化生長因子 -β（TGF-β）、血小板衍生生長因子（PDGF）等細胞因子，模擬體內肺成纖維細胞活化過程，觀察細胞增殖速率、膠原蛋白合成量、α- 平滑肌肌動蛋白（α-SMA）表達水平的變化，進而解析肺纖維化的分子機制；同時，還可利用該細胞構建肺纖維化體外模型，篩選具有抗纖維化作用的藥物，通過檢測藥物對細胞增殖、膠原合成的抑制效果，評估藥物的療效與安全性。在慢性阻塞性肺疾病研究中，WML2 細胞可用于研究香煙提取物、空氣污染顆粒等有害物質對肺成纖維細胞功能的影響，觀察細胞炎癥因子（如 IL-6、TNF-α）分泌水平、氧化應激反應的變化，揭示環境因素在 COPD 發病中的作用機制。

在藥物篩選方面，該細胞系可作為肺部疾病治療藥物的體外評價模型，用于篩選針對肺纖維化、肺部炎癥等疾病的候選藥物。例如，在抗肺纖維化藥物篩選中，可將候選藥物與活化的 WML2 細胞共培養，通過 MTT 法檢測細胞增殖抑制率、ELISA 法檢測膠原蛋白分泌量、Western blot 法檢測纖維化相關蛋白（如 ColⅠ、α-SMA）的表達水平，綜合評估藥物的抗纖維化活性；同時，還可利用該細胞研究藥物的作用靶點與信號通路，為藥物研發提供分子機制依據。此外，在細胞生物學研究中，WML2 小鼠肺成纖維細胞還可用于研究細胞增殖、分化、凋亡、信號通路調控等基礎生物學過程，為解析肺組織發育與穩態維持的分子機制提供實驗數據。

綜上所述，WML2 小鼠肺成纖維細胞憑借其穩定的生物學特性、便捷的培養條件及廣泛的功能適用性，成為肺部疾病研究與藥物研發領域的重要工具，為推動呼吸系統疾病機制解析、治療策略優化及藥物創新發揮了關鍵作用，未來在肺部精準醫學研究中仍將具有廣闊的應用前景。