Wrh-f2大鼠肝癌細胞

Wrh-f2大鼠肝癌細胞是從化學誘導或自發性大鼠肝癌模型中分離、純化并穩定傳代獲得的惡性腫瘤細胞群體，因能高度模擬體內肝癌的病理形態、分子特征及侵襲轉移行為，且體外培養穩定性強、易進行實驗操作，成為探究肝癌發病機制、篩選抗癌藥物及驗證治療方案的核心模型，在腫瘤學、分子生物學、藥理學研究中應用廣泛，對肝癌臨床診療技術的突破具有重要參考意義。

從細胞來源與培養特性來看，這類大鼠肝癌細胞的原始構建多通過化學誘導法：向特定品系大鼠（常用 Wistar 或 SD 大鼠）腹腔或皮下注射致癌劑（如二乙基亞硝胺 DEN、黃qu霉素 B1），誘導肝細胞發生惡性轉化形成肝癌，待腫瘤生長至直徑 1-2cm 時，無菌條件下剝離腫瘤組織；去除壞死部分與正常肝組織后，將活性腫瘤組zhi剪碎為 1-2mm3 的小塊，采用膠原mei溶液分步消化，破壞腫瘤間質結構釋放單個癌細胞；經 100 目細胞篩過濾去除組織碎片，以 800-1000rpm 低速離心純化，結合含肝細胞生長因子（HGF）的選擇性培養基培養，最終獲得純度超 90% 的目標細胞。原代培養的細胞約 24-36 小時開始貼壁，初期形態以多邊形、梭形為主，隨培養時間延長形成邊界模糊的不規則細胞群落；傳代培養時，細胞可穩定傳代 15-20 代仍保持惡性特征，已建立標準化永生化細胞系，遺傳背景清晰，保留肝癌關鍵分子標志物（如甲胎蛋白 AFP、細胞角蛋白 19 CK19），傳代過程中分子表型無明顯漂移，大幅降低實驗重復性成本，成為肝癌研究的常用工具。

在形態與生物學功能方面，這類大鼠肝癌細胞展現出典型的肝癌惡性細胞特征與功能特異性。顯微鏡下觀察，細胞體積較大，核質比顯著高于正常肝細胞，細胞核多呈圓形或橢圓形，核仁明顯且數量增多，染色質分布不均，常出現多核、巨核或核分裂象異常；細胞質內線粒體數量增多但功能紊亂，部分細胞可見脂滴堆積（模擬肝癌細胞代謝異常），少數細胞分泌甲胎蛋白（肝癌特異性標志物）。生物學功能上，核心惡性特征體現在三方面：一是強增殖能力，適宜培養條件下倍增時間約 30-40 小時，可突破正常細胞增殖周期限制，持續分裂形成密集克隆，適合開展增殖調控機制研究；二是侵襲轉移潛能，Transwell 侵襲實驗顯示，細胞能分泌基質金屬蛋白酶（MMP-2、MMP-9）降解基底膜，向膜下遷移，接種于裸鼠肝臟可形成原位腫瘤并發生肺轉移，模擬體內肝癌侵襲轉移過程；三是代謝異常特性，細胞糖酵解能力增強（瓦伯格效應），葡萄糖攝取率顯著高于正常肝細胞，可用于研究肝癌代謝重編程機制。培養條件上，細胞適合在含 10%-15% 胎牛血清的 DMEM 培養基中生長，添加 10ng/mL HGF 可促進細胞活性，于 37℃、5% CO?飽和濕度培養箱內培養，需定期檢測細胞活力與污染情況，確保惡性特征穩定。

在病理關聯與機制研究方面，這類大鼠肝癌細胞是解析肝癌發病機制與病理進程的重要工具。分子特征上，細胞攜帶肝癌典型基因突變（如 p53 突變、CTNNB1 突變），與人類肝癌分子譜高度一致，可用于研究癌基因激活、抑癌基因失活對肝癌發生的影響；同時，細胞高表達肝癌相關信號通路分子（如 PI3K、AKT），為探索信號通路異常激活機制提供模型。病理進程研究中，體外模擬肝癌微環境（如缺氧、炎癥刺激、肝星狀細胞共培養）可觀察細胞功能變化：缺氧條件下，細胞激活 HIF-1α 信號通路，促進血管內皮生長因子（VEGF）分泌，加速腫瘤血管生成；炎癥因子（TNF-α、IL-6）刺激后，細胞侵襲能力增強，伴隨上皮 - 間質轉化（EMT）相關蛋白（N-cadherin、Snail）表達上調，為揭示肝癌惡性進展機制提供實驗依據。此外，細胞還可用于研究乙肝病毒、丙肝病毒相關肝癌的發病關聯，通過體外轉染病毒基因，觀察細胞惡性轉化過程，明確病毒致瘤機制。

在多領域研究應用方面，這類大鼠肝癌細胞是生物醫學研究的 “多功能平臺"。腫瘤機制研究中，通過基因測序、蛋白質組學篩選肝癌關鍵驅動基因與信號通路，利用 CRISPR-Cas9 技術敲除目標基因（如 p53），觀察細胞增殖、侵襲變化，驗證基因功能；例如，敲除突變型 p53 后，細胞增殖速度顯著減慢，證明其致癌作用。抗癌藥物研發中，細胞是篩選hua療藥物、靶向藥物的核心模型：MTT 法檢測藥物對細胞活力的抑制率，流式細胞術分析凋亡率，Western blot 檢測凋亡相關蛋白（Caspase-3、Bax）表達；構建裸鼠原位肝癌模型，給藥后監測腫瘤體積與小鼠生存時間，驗證藥物體內療效。臨床診斷技術開發中，基于細胞特異性標志物（AFP、GPC3）研發肝癌診斷試劑盒，通過檢測患者血液標志物實現早期篩查；利用細胞構建藥敏模型，預測患者對藥物的敏感性，為個性化治療提供依據。

從科研價值與學科發展來看，這類大鼠肝癌細胞推動了腫瘤學與肝病學領域進步，為肝癌診療創新提供支撐。機制研究領域，基于細胞的成果明確了多個肝癌驅動基因與信號通路，發現潛在治療靶點（如 mTOR、VEGF），為靶向藥物研發指明方向；目前，針對這些靶點的抑制劑已進入肝癌臨床試驗。藥物研發領域，細胞模型加速了抗癌藥物臨床轉化，多種抗肝癌藥物通過該模型前期篩選，顯著提高患者生存率。此外，隨著類器官技術與單細胞測序發展，將細胞與肝星狀細胞、免疫細胞共培養構建 “肝癌類器官"，可更真實模擬體內腫瘤微環境，結合單細胞測序分析細胞異質性，為肝癌精準治療與耐藥機制研究提供新平臺。

綜上所述，這類大鼠肝癌細胞憑借惡性特征典型、分子表型穩定、臨床相關性強等優勢，成為肝癌研究的 “核心模型細胞"。其在機制解析、藥物研發、診斷技術開發中的應用，既推動基礎科研突破，又為臨床實踐提供支持，對肝癌學科發展與患者健康保障具有不可替代的科學價值。